本期為您推薦齊魯工業(yè)大學(xué)徐振上老師研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在知名期刊《LWT - Food Science and Technology》上的一篇文章：High-level secretory production of lysostaphin in Escherichia coli mutant by codon optimization and atmospheric and room temperature plasma mutagenesis.?
文章摘要內(nèi)容如下：
? ? ??溶葡萄球菌酶是一種抗菌劑，可以特異性地溶解金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁，因此具有預(yù)防金黃色葡萄球菌引起的食物腐敗的潛力，但它天然來源的產(chǎn)量低，且模仿葡萄球菌屬于致病菌，不適合工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)。
? ? ??本研究將溶葡萄球菌酶編碼基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化(Opt-lys)，然后連接到pET-22b（+）載體中，在大腸桿菌BL21(DE3)中實(shí)現(xiàn)異源表達(dá)，結(jié)果顯示溶葡萄球菌酶也可被大腸桿菌分泌到細(xì)胞外。基于此，本研究建立了一種利用雙層平板篩選分泌性溶葡萄球菌酶突變體的高通量篩選方法。結(jié)合常壓室溫等離子體（ARTP）誘變方法，獲得了細(xì)胞外活性最高的菌株BL21(DE3)/pOpt-lys4-18。經(jīng)過發(fā)酵條件優(yōu)化后，確定其最大胞外活性為155.3U/mL，胞外蛋白濃度達(dá)到442.26 mg/L。因此，本研究提供了一種能夠高效生產(chǎn)溶葡萄球菌酶的重組菌株和更好的突變體篩選方法，為溶葡萄球菌酶的應(yīng)用和研究奠定了基礎(chǔ)。
文章精彩內(nèi)容如下：
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? ? ??溶葡萄球菌酶是一種抗菌劑，可以特異性地溶解金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁，因此具有預(yù)防金黃色葡萄球菌引起的食物腐敗的潛力，但它天然來源的產(chǎn)量低，且模仿葡萄球菌屬于致病菌，不適合工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)。
? ? ??本研究將溶葡萄球菌酶編碼基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化(Opt-lys)，然后連接到pET-22b（+）載體中，在大腸桿菌BL21(DE3)中實(shí)現(xiàn)異源表達(dá)，結(jié)果顯示溶葡萄球菌酶也可被大腸桿菌分泌到細(xì)胞外。基于此，本研究建立了一種利用雙層平板篩選分泌性溶葡萄球菌酶突變體的高通量篩選方法。結(jié)合常壓室溫等離子體（ARTP）誘變方法，獲得了細(xì)胞外活性最高的菌株BL21(DE3)/pOpt-lys4-18。經(jīng)過發(fā)酵條件優(yōu)化后，確定其最大胞外活性為155.3U/mL，胞外蛋白濃度達(dá)到442.26 mg/L。因此，本研究提供了一種能夠高效生產(chǎn)溶葡萄球菌酶的重組菌株和更好的突變體篩選方法，為溶葡萄球菌酶的應(yīng)用和研究奠定了基礎(chǔ)。
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